实验类型
细胞
硬组织病理
代谢组学/蛋白组学
PCR/核酸电泳
普通组织病理
qPCR
WB
蛋白提取
电泳制胶
WB实验
蛋白定量
封闭孵育
蛋白电泳
蛋白转膜
染胶染膜(可选)
成像检测
WB整体方案
动物
组化/荧光/原位杂交
DMPK
分子克隆
超微病理
生化/ELISA
WB整体方案
样本制备
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2017-250UL | 50×Cocktail | 250 μL | 100 | |
| Y2018-1ML | 磷酸化蛋白酶抑制剂 | 1 mL | 45 | |
| Y2019-1ML | PMSF(100mM) | 1 mL | 10 | |
| YR-200 | 0.5mL/1.5mL/2.0mL 双面板 | 60孔 | 5 | |
| YR-150AL | 1.5/2.0mL金属离心管架 | 60孔 | 25 | |
| Y2291-50T | 细胞浆与细胞膜蛋白分离提取试剂盒 | 50 T | 300 | |
| Y3752-50T | 细胞核与细胞浆蛋白分离提取试剂盒 | 50 T | 400 | |
| Y3753-50T | 细胞浆、细胞膜与细胞核蛋白分步提取试剂盒 | 50 T | 500 | |
| Y2203-10ML | WB蛋白拖尾优化试剂 | 10 mL | 350 | |
| YT-200-M | 研磨管 2.0mL(无酶) | 500个/袋 | 80 | |
| YLX-1024F | 离心机 微量高速低温型 | 台 | 26000 |

1.1 组织取材

1.2 配制完全裂解液


1.3 蛋白提取

1.4 组织研磨,收集上清




注意事项
1. 完全裂解液组分推荐配比:RIPA裂解液: 50×Cocktail: PMSF: 磷酸酶抑制剂=100: 2: 1: 1
2. RIPA裂解液在裂解过程中,溶液变得粘稠,可加入全能核酸酶 (G3461-50KU)降解核酸,并用移液器反复吹打至不粘稠

扫二维码,观看实验流程
蛋白定量
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2012-250ML | Bradford 法蛋白定量检测试剂盒 | 250 mL | 100 |

2.1、选择合适的蛋白定量试剂盒

2.2、比色测定吸光度值,计算蛋白浓度

注意事项:
1、可根据下表,选择蛋白定量试剂盒
| 检测方法 | BCA法 | Bradford法 |
| 耐受物质 | 高浓度的去垢剂 例如:5%的SDS、5%的Triton X-100、5%的Tween-20、60、80等 | 螯合剂或还原剂 例如:1mM的β-巯基乙醇、 5mM的二硫苏糖醇 |
| 不耐物质 | 螯合剂和高浓度还原剂 例如:EGTA、DTT、β-巯基乙醇 | 高浓度的去垢剂 例如:SDS、Triton X-100、 Tween-20、60、80 |
| 比色测定波长 | 562 nm | 595 nm |
| 线性范围 | 50-2000 μg/mL | 25-1000μg/mL |
2、确保样品稀释适当,避免过高的蛋白浓度影响测定结果
制胶
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2204-50T | 一步法手动梯度PAGE彩色凝胶快速配制试剂盒 | 50 T | 320 | |
| Y2188-50T | 一步法PAGE彩色凝胶超快速配制试剂盒(10%) | 50 T | 120 | |
| Y2195-50T | 一步法免染 PAGE 彩色凝胶超快速配制试剂盒(8%) | 50 T | 150 | |
| YVE-4-ZJ | 通用分体式制胶器 | 套 | 550 | |
| YR-001 | 多彩电泳玻璃板沥水架 | 个 | 10 | |
| Y2317-10 | 4-12% Tris SwePAGE预制胶(11孔) | 10 片/盒 | 120 | |
| Y2192-2.5L | 自动制胶仪配套试剂盒 | 2.5 L(约260T) | 248 | |
| YVE-V10 | 大通量制胶器 | 套 | 2400 |
1、手动制胶




2、预制胶


3、自动制胶






制样
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| YP-10WB-C | WB点样盒装吸头 | 96支/盒 | 20 | |
| YMB-MC | 金属浴(加热制冷振荡型) | 台 | 6500 |


配液
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2160-1L | 1×SWE快速高分辨电泳缓冲液(即用型) | 1 L(即用型水剂) | 20 | |
| Y4712-500ML | 实验室专用纯水 | 500 mL | 15 | |
| YF-PC-20001 | 2000 mL三角试剂瓶(无酶 单个装) | 2000 mL(单个装) | 24 | |
| YMS-200A | 加热磁力搅拌器(智能加热型) | 台 | 3500 | |
| Y2159-1L | 1×免冰浴快速转膜缓冲液(即用型) | 1 L(即用型水剂) | 20 |



蛋白电泳
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2102-250UL | Prestained Protein Marker Ⅹ(10-180 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2069-250UL | Prestained Protein Marker II (10-200 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2098-250UL | Prestained Protein Marker Ⅶ (8-195 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2094-250UL | Prestained Protein Marker Ⅳ (8-200 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2100-250UL | Prestained Protein Marker Ⅷ (8-270 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2096-250UL | Prestained Protein Marker Ⅵ (55-320 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2101-250UL | Prestained Protein Marker Ⅸ (2-40 kDa) | 250 μL | 160 | |
| Y2097-250UL | Western Protein Marker I (可显影) | 250 μL | 160 | |
| Y2099-250UL | Western Protein Marker Ⅱ(可显影) | 250 μL | 160 | |
| Y2200-100ML | 电泳专用消泡剂 | 100 mL | 65 |






蛋白转膜
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| YSLQP | WB专用切胶托盘 | 个 | 15 | |
| YCD-74 | WB专用切胶铲 | 个 | 30 | |
| YVT-NZ | WB专用镊子 | 个 | 10 |







封闭
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2063-500ML | 无蛋白快速封闭液 | 500 mL | 120 | |
| Y6030-9 | 抗体孵育盒(9格) | 9格 | 50 | |
| YS-3D100 | 多功能型摇床(水平+钟摆+3D) | 台 | 5000 | |
| Y2161-1L | 1×TBST缓冲液(即用型) | 1 L(即用型水剂) | 20 |



抗体孵育
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2036-100ML | 一抗稀释液 | 100 mL | 100 | |
| Y2020-100ML | Western二抗稀释液 | 100 mL | 100 | |
| YYC-FP200 | 水平摇床(分体式) | 台 | 2200 |


成像检测
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2172-200ML | ECL发光液组合装 | 200 mL | 400 |





染胶染膜 (可选)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y2091-25T | 蛋白银染试剂盒 | 25 T | 450 | |
| YS-3D100 | 多功能型摇床(水平+钟摆+3D) | 台 | 5000 | |
| Y2022-100ML | 丽春红染色液 | 100 mL | 100 |



注意事项:
1.可根据样本蛋白含量选择蛋白胶染色试剂,考马斯亮蓝染色可检测20ng蛋白,银染可检测低于0.5ng蛋白
2.丽春红对印迹膜染色后,用适当溶液漂洗2-3次,可以进行后续的WB实验
