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改良吉姆萨染色

¥20
货号:YP1085
品牌:YIKE
规格:
数量:

服务介绍:

组织切片及细胞涂片经吉姆萨染色后,各类细胞由于其成份的差异而呈现出不同的着色,从而达到分辨各类细胞的目的。本项目为改良吉姆萨染色,适用于血涂片,肺泡灌洗液细胞滴片,骨髓细胞涂片,石蜡切片和冰冻切片的染色,染色目的多为观察各类炎性细胞的特征及数量分布。


实验结果展示:

图片 1.jpg

图片 2.jpg

小鼠肺泡灌洗液涂片,未裂解红细胞


实验流程:

  涂片/组织切片-改良吉姆萨染色-脱水封片-显微镜镜检


结果判读:

细胞类型

细胞特征及染色结果

成熟红细胞

圆饼状,粉红色,无核

中性粒细胞

细胞核蓝色,呈马蹄形,杆状或分叶形;胞质淡紫红色

嗜酸性颗粒

细胞核蓝色,呈马蹄形,杆状或分叶形;胞质内深红色颗粒

嗜碱性粒细胞

细胞核蓝色,呈马蹄形,杆状或分叶形;胞质内蓝紫色颗粒

淋巴细胞

细胞较小,核蓝色小而圆;细胞质较少呈蓝紫色

单核细胞/巨噬细胞

细胞较大,细胞核蓝色大而圆;细胞质浅蓝紫色



样本准备方法及送样运输要求(为保证染色成功率,血液、肺泡灌洗液建议客户按以下方法自行涂片固定后送样):

1.涂片的制作方法:

1.1 血涂片制备:

(1)取新鲜血液(若用抗凝管收集的血液,放置最好不要超过24 h,否则血液中白细胞的数量以及种类会明显减少),选用干净的粘附玻片,用移液枪吸取10 μL的血液,滴加在玻片的一侧(一般为磨砂对侧)。

(2)再取一片辅助玻片(也可选用盖玻片,依据个人手的力道习惯选择),以45°角将其宽边靠近血液,血液沿着接触边缘向两边晕开,当两边都到达边缘时,轻轻地稳健且匀速地推向磨砂面一侧,进行涂片,然后快速果断地拿走载玻片,可见涂片首尾分明,厚薄均匀。(一般在保证涂抹速度力道适中的情况下,取走辅助玻片时载玻片上的血几乎无残留,且涂抹出的血涂片细胞无明显破碎、变形。在显微镜下可观察到细胞呈单个紧密排列,整体比较均匀。)

(3)自然晾干后,用甲醇浸泡固定15 min,自然晾干后4℃保存运输。

1.2 肺泡灌洗液涂片制备:

(1)取肺泡灌洗液悬液1500 rpm 4℃离心10 min去上清。

a、若肉眼观察无明显细胞沉淀,弃上清留离心管底部少量液体直接加入50  μL卡诺氏固定液轻柔吹打重悬、室温固定15 min,固定过程中可晃动离心管,避免细胞沉淀沉降离心管底部导致固定不充分固定后用移液枪吹打混匀,涂于粘附载玻片上提前用组化笔画好的小圆圈中3 cm×2 cm的椭圆

b、若细胞沉淀量很多,黄豆大小或更大,弃上清后加入500 μL卡诺氏固定液固定细胞沉淀15 min,固定过程中可晃动离心管,避免细胞沉淀沉降离心管底部导致固定不充分,固定后的细胞沉淀1500 rpm离心5 min弃固定液,用PBS或生理盐水重新重悬细胞沉淀,取200 μL悬液,涂于粘附载玻片上提前用组化笔画好的大圆圈中(最大长边约5 cm,最大短边约2 cm的椭圆)。在显微镜下观察细胞量的多少,若还是过厚,再用PBS对倍稀释该细胞悬液,直至在显微镜下观察到细胞量涂布均匀。

(2)用移液枪将细胞悬液铺满整个组化笔圈内,涂片放置自然晾干(不可通过烘箱加快晾干)。

(3)将晾干后的涂片,自然风干,4℃保存运输。


2. 石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。

样本种类

预处理过程

固定条件

保存运输条件

备注

血液

5-10 μL

血液涂片

甲醇固定15 min后自然晾干

4℃保存运输

血液要用EDTA抗凝管采集,新鲜血液需取血后立即涂片固定。

肺泡灌洗液

50-150 μL细胞悬浮液涂片

 

卡诺氏固定液固定15 min后自然晾干

4℃保存运输

肺泡灌洗液取样时,灌洗动作要轻柔,不能使肺脏出血,灌洗力度过大会造成一部分细胞形态破裂。

3. 骨髓细胞样本、细胞涂片样本需要客户自行制作涂片,涂片后甲醇固定15 min,自然干燥后,将晾干的涂片,4℃保存运输。(细胞样本1000rpm离心5 min后进行涂片)




仅供科研用途,不可用于临床诊断!


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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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