产品信息

产品简介

亚甲基蓝又叫美蓝、次甲基蓝、次甲蓝等，是一种芳香杂环化合物，可用于酵母菌和细菌的活性检测。活酵母菌具有较强的还原能力，能使亚甲基蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，死酵母菌或代谢缓慢的酵母菌因无还原能力或还原能力弱，被染色成蓝色或淡蓝色，从而将死、活酵母菌区分开来。在好氧性细菌样本检测中，亚甲基蓝作为一种氧化还原指示剂，好氧性细菌的呼吸作用可以使亚甲基蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，菌量越大，菌的活性越高，染液从蓝色变为无色所需的时间越短，溶液中细菌总的氧化还原能力就越强。

储存与运输

室温避光保存和运输；有效期12个月。

组成

操作步骤

1. 检测酵母菌细胞活性：

（1）取一片清洁干净的载玻片，在载玻片中央滴加一滴（约5 μL）亚甲基蓝染液，再取1滴酵母菌菌液（约5 μL）（酵母菌菌液以OD₆₀₀=0.6为例）放入染液中，混匀；

（2）用镊子取一张盖玻片，先将盖玻片一端与混合液接触，之后将盖玻片倾斜45°后缓缓放下盖玻片覆盖住菌液；

（3）1 min后可在显微镜高倍镜下观察酵母菌的形态结构，并可根据颜色区分活、死酵母菌，无色透明的为活酵母菌，蓝色或淡蓝色的为死酵母菌或代谢微弱的活酵母菌。

2. 检测好氧性细菌活性：

（1）取1 mL的细菌菌液（以OD₆₀₀=1为例）加入离心管中，然后再取500 μL的亚甲基蓝染色液加入含菌液的离心管中，混匀；

（2）室温条件下，观察亚甲基蓝溶液的褪色情况，在相同时间内，溶液褪色的时间越短，表明菌的活性越高，还原能力越强。

注意事项

1. 加入亚甲基蓝的量不宜太多，使背景呈现淡蓝色即可，过多会溢出使背景色较重。在进行正式实验染色之前，先做一个预实验，确定可以有效区分活死酵母细胞的亚甲基蓝染液量。（可以先按照亚甲基蓝染液：酵母菌悬浮液=1：1的比例进行试验，若背景蓝色过深，不易观察，则梯度减少亚甲基蓝的量继续进行测试。）

2. 进行活性鉴定时，菌与染液要混匀，盖盖玻片时，动作要轻柔缓慢，尽量减少气泡的产生，以免影响实验观察。

3. 染色结果易褪色，不宜长时间保存，染色后必须立即进行镜检及图像采集。

4. 该染色方法不能区分细菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，只能进行好氧性细菌的活性及氧化还原能力强弱的定性判断，若要鉴定细菌类型，推荐革兰氏染色液（Y1076）。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套、口罩操作。禁止口鼻吸入，避免皮肤、黏膜直接接触试剂。如果不慎接触到敏感部位，应及时用大量清水冲洗。

结果展示

酵母菌细胞活性检测

无色透明的为活酵母菌细胞，蓝色或淡蓝色的为死酵母菌细胞或代谢微弱的酵母菌细胞，背景淡蓝色。

细菌活性检测

注：从左至右依次为阴性对照组（无菌组）、大肠杆菌组、枯草芽孢杆菌组，实验结果显示在该实验条件下，大肠杆菌组的活性及还原能力均比枯草芽孢杆菌组的活性好。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！