产品信息

产品简介

本产品是一种单链DNA（ssDNA）定量试剂盒，其中包含了荧光定量试剂、缓冲Buffer以及标准品，可对10 pg/µL到200 ng/µL的寡核苷酸或长链ssDNA进行简单、灵敏、精确的定量，核苷酸和6个碱基以下的短寡核苷酸不干扰定量分析，并且对常见污染物，如盐类、游离核苷酸、溶剂、去污剂、蛋白质等具有良好的耐受性，从而确保了实验结果的准确性和可靠性。然而，本产品在与双链DNA（dsDNA）和RNA结合时也会表现出荧光信号增强。本产品适用于任何Qubit荧光仪。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；ssDNA Reagent（200×in DMSO）2-8℃避光保存，ssDNA Standard 1和ssDNA Standard 2 2-8℃保存，ssDNA Buffer室温保存；有效期12个月；如果需要长期保存，标准品可储存于-20°C。

组成

实验流程图

操作步骤

1. 使用前，将试剂盒中的各组分恢复至室温；

2. 提前计算使用0.5 mL YCR管的数量，用于标准品与样品检测（注意：仅使用薄壁透明0.5 mL YCR管，推荐Qubit™检测管（Cat. no. Q32856）或Axygen YCR-05-C tubes（Cat. no. 10011-830））；

3. 在管盖上做好标记（注意：不要在管壁做标记，以免干扰信号数据读取）；

4. 配制检测工作液：选择合适的配制容器，使用ssDNA Buffer按照1:200的比例将ssDNA Reagent（200×in DMSO稀释至1×（假如有8个样品，加上2个标准品，需准备10个0.5 mL YCR管，每管200 µL工作液，总共需要准备2 mL的检测工作液，即取1990 µL的ssDNA Buffer，加入10 µL ssDNA Reagent（200×in DMSO）），现配现用（注意：禁止用玻璃容器配制工作液）；

5. 制备检测标准品：分别取190 μL检测工作液至两个0.5 mL标准品YCR管中，其中一个0.5 mL标准品YCR管中加入10 μL ssDNA Standard 1，另一个0.5 mL标准品YCR管中加入ssDNA Standard 2，做好标记（标准品需按照正确顺序插入Qubit荧光仪），轻轻涡旋振荡2-3 s，尽量避免气泡产生，瞬时离心，将液体收集于管底；

6. 制备检测样品：取180-199 μL检测工作液至0.5 mL样本YCR管中，分别加入1-20 μL待检样本，使YCR管中每个样本终体积为200 μL，轻轻涡旋振荡2-3 s，尽量避免气泡产生，瞬时离心，将液体收集于管底；

7. 将所有检测YCR管置于室温避光孵育2 min；

8. 按照Qubit荧光仪的操作说明，选择选择Oligo-ssDNA检测程序测定浓度。

注意事项

1. ssDNA Reagent（200×in DMSO）注意避光，以减缓荧光淬灭。

2. 各个试剂使用前请上下轻轻颠倒混匀，避免取样不均匀影响数据检测。

3. 1×工作液建议现配现用，以保证最佳结果。

4. 试剂盒对ssDNA的选择度并不高于dsDNA，待检样品应避免dsDNA污染。

5. 检测标准品与检测样品在室温避光条件下可稳定保存3小时，请于3小时内完成所有检测工作。

6. 请勿将检测管拿在手中太长时间，这样会加热溶液，产生读数差异。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！