产品信息

产品简介
 

本试剂盒利用磁珠可逆的结合核酸的特性以及特有的缓冲体系，可快速、高效的纯化YCR产物和酶切产物，还可从琼脂糖凝胶中分离高纯度的特定DNA片段。整个操作过程无需离心，仅30 min可回收80%以上的100 bp-10 kb的DNA片段。纯化后的DNA片段可应用于酶切反应、连接反应、YCR扩增、测序等分子生物学实验。

储存与运输

室温运输，室温储存；有效期12个月。

组成

使用前准备

1. 使用前请向Buffer YPW中加入指定量（见瓶身）的无水乙醇。

2. 自备磁力架和1.5 mL灭菌的离心管。

操作步骤

一、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段

1. 从琼脂糖凝胶中切下含有特异的DNA条带的凝胶块，尽量除去多余部分（切胶时不要将胶块长时间暴露于紫外灯下，防止DNA损伤）。将切下的凝胶块放入1.5 mL灭菌的离心管中（尽量捣碎胶块，有助于加快溶解），称取重量；

2. 向离心管中加入一定量的Buffer SPS（例如切下的凝胶块重量为0.1 g，则加入100 µL的Buffer SPS），60℃加热5-10 min，期间不断地上下颠倒离心管，直至胶块完全溶解；

3. 向上一步所得的溶液中加入等体积的无水乙醇，使用移液器或涡旋仪混匀，再加入0.6倍YCR体积或酶切体积的SweMag Beads（SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀），使用移液器或涡旋仪混匀；

4. 室温放置5 min，期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次，至磁珠分散均匀；

5. 将离心管移至磁力架上静置30 s，直至磁珠完全吸附，将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，勿将磁珠吸出）；

6. 加入300 μL Buffer YPW，移开磁力架，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀；将离心管移至磁力架上静置30 s，再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，请务必吸尽离心管内残留的液体）；

7. 重复操作步骤6；

8. 将离心管盖打开，室温放置5-10 min或65℃放置3-5 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）；

9. 移去磁力架，加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置3 min；

10. 将离心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取上清至一新的离心管中，即得高纯度的DNA。

二、从YCR反应液或酶切反应液中回收DNA片段

1. 向YCR反应体系或酶切反应体系中加入2倍体积的Buffer SPS和无水乙醇，使用移液器或涡旋仪混匀，再加入0.6倍YCR反应体积或酶切反应体积的SweMag Beads（SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀），使用移液器或涡旋仪混匀；

2. 室温放置5 min，期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次，至磁珠分散均匀；

3. 将离心管移至磁力架上静置30 s，直至磁珠完全吸附，将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，勿将磁珠吸出）；

4. 加入300 μL Buffer YPW，移开磁力架，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀；将离心管移至磁力架上静置30 s，再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，请务必吸尽离心管内残留的液体）；

5. 重复操作步骤4；

6. 将离心管盖打开，室温放置5-10 min或65℃放置3-5 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）；

7. 移去磁力架，加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置3 min；

8. 将离心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取上清至一新的离心管中，即得高纯度的DNA。

注意事项

1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。

2. 磁珠悬液在保存过程中应避免冷冻。

3. 磁珠易沉淀，使用前应摇匀或涡旋混匀。

4. 加入磁珠前，需要将其他试剂混合均匀。

5. 洗脱DNA前应使乙醇完全挥发，避免残留的乙醇影响下游实验。

6. 请勿长时间干燥磁珠，以免影响DNA洗脱效率。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附操作流程简图

（产品包装升级中，以实物为准。）