产品信息

产品简介

本产品为聚丙烯酰胺凝胶，单片胶为13孔，单孔最大上样量为60 μL；本预制胶优化于Bis Tris凝胶体系，同等胶浓度条件下拥有更高的分辨率，蛋白条带更加锐利清晰，可配套使用Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer、Tris-MES SDS-PAGE Running Buffer；本产品中搭配Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer（Powder）（Y2062）；本产品不含SDS，可用于非变性电泳，依赖于采用合适的电泳缓冲液和相应试剂；与传统实验室自配凝胶相比较，SwePAGE预制胶具有以下优点：

简单易用：即开即用，无需自配，无需接触单体丙烯酰胺等有毒试剂

上样量大：最大上样量可达60 μL

高分辨率：胶配方优化于Bis Tris体系，拥有更高的分辨率，蛋白条带更加锐利

稳定性更优：胶缓冲液pH 6.5，能大大减少丙烯酰胺的降解，提高凝胶稳定性

兼容性更佳：兼容大多数小型蛋白凝胶垂直电泳槽（如servicebio、六一、Bio-Rad、天能等）

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，有效期18个月。

组成

SwePAGE预制胶使用步骤

1. 将试剂盒中提供的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer（Powder）用纯水溶解并定容至1 L备用；

2. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的预制胶，参照附表一；

3. 将SwePAGE预制胶从包装袋中取出，撕掉胶板底部的胶带，见图1；

 图1：撕下胶板底部胶带（红色方框指示处）

4. 将梳子从胶板中慢慢推出，注意两边推力尽量保持一致，见图2；

 图2：将梳子从胶板中推出（红色方框指示处）

5. 预制胶电泳前准备工作：以servicebio垂直电泳仪（YVE-2）为例，均带有两款密封硅胶条，凸起款（图3A）和平直款（图3D），原装一般为凸起款，该类密封硅胶条顶部有突起结构，而SwePAGE预制胶其短板是凹形结构且该部位是平直的，因此电泳前需将电泳槽中具有突起结构的密封硅胶条取出反装，平直面朝外或直接换成平直款，防止电泳漏液。具体操作如下：将电泳槽中的U型密封条取出（图3A、B），反装胶条，平直面朝外（图3C）或换成平直款（图3D）重新插回框架内的凹槽，见图3；如使用六一品牌电泳槽以上步骤可忽略；完成以上步骤后将预制胶板放入凝胶电泳装置中；

 图3：电泳仪反/换装胶条

注：塑料板装载的时候矮边沿一面朝内，若只进行单块预制胶电泳，另一边请插入挡板，以防电泳液漏液；此处以自研电泳仪凸起款密封胶条为例，如无凸面忽略此步骤。

6. 电泳槽内倒入足够量的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer，使其覆盖上样孔5-7 mm，在外槽中加入相同的电泳缓冲液以确保适当的冷却。为了获得最好的效果，外槽的缓冲液需要加到比内槽液面稍低的位置，不可漫过胶板；

7. 使用注射器或吸头吸取适量Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer，将上样孔轻轻冲洗干净，去除孔内气泡和残留的凝胶，电泳条件参照附表二；

8. 电泳完成后取出胶板，通过撬具小心插入到胶板之间的缝隙（见图4红色框），从上到下依次轻轻撬开塑料板，直至完全撬开；凝胶可能粘连在胶板的任意一侧，将无凝胶的胶板取下，有凝胶的胶板上有胶一侧浸入水中，胶板倾斜轻轻提起，凝胶掉入水中后，将凝胶从水中取出进行染色或者后续转膜操作。

图4：撬开胶板(撬一侧为例，另一侧重复此步骤)

注意事项

1. SwePAGE预制胶的pH为6.5左右，不含SDS，可用于酸性蛋白的非变性凝胶电泳。

2. 点样时吸头尖端垂直插入到上样孔中能够获得最佳上样效果，避免吸头戳破凝胶或使胶板变形导致样品渗漏。

3. 本预制胶可用Y2062或Y2088作为电泳缓冲液，但不能使用Tris-Glycine缓冲液。

4. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。

附表一：凝胶选择参照表

附表二：预制胶电泳参数

兼容性更佳：兼容大多数小型蛋白凝胶垂直电泳槽（如servicebio、六一、Bio-Rad、天能等）

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，有效期18个月。

组成

SwePAGE预制胶使用步骤

1. 将试剂盒中提供的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer（Powder）用纯水溶解并定容至1 L备用；

2. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的预制胶，参照附表一；

3. 将SwePAGE预制胶从包装袋中取出，撕掉胶板底部的胶带，见图1；

图1：撕下胶板底部胶带（红色方框指示处）

4. 将梳子从胶板中慢慢推出，注意两边推力尽量保持一致，见图2；

图2：将梳子从胶板中推出（红色方框指示处）

5. 预制胶电泳前准备工作：以servicebio垂直电泳仪（YVE-2）为例，均带有两款密封硅胶条，凸起款（图3A）和平直款（图3D），原装一般为凸起款，该类密封硅胶条顶部有突起结构，而SwePAGE预制胶其短板是凹形结构且该部位是平直的，因此电泳前需将电泳槽中具有突起结构的密封硅胶条取出反装，平直面朝外或直接换成平直款，防止电泳漏液。具体操作如下：将电泳槽中的U型密封条取出（图3A、B），反装胶条，平直面朝外（图3C）或换成平直款（图3D）重新插回框架内的凹槽，见图3；如使用六一品牌电泳槽以上步骤可忽略；完成以上步骤后将预制胶板放入凝胶电泳装置中；

图3：电泳仪反/换装胶条

注：塑料板装载的时候矮边沿一面朝内，若只进行单块预制胶电泳，另一边请插入挡板，以防电泳液漏液；此处以自研电泳仪凸起款密封胶条为例，如无凸面忽略此步骤。

6. 电泳槽内倒入足够量的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer，使其覆盖上样孔5-7 mm，在外槽中加入相同的电泳缓冲液以确保适当的冷却。为了获得最好的效果，外槽的缓冲液需要加到比内槽液面稍低的位置，不可漫过胶板；

7. 使用注射器或吸头吸取适量Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer，将上样孔轻轻冲洗干净，去除孔内气泡和残留的凝胶，电泳条件参照附表二；

8. 电泳完成后取出胶板，通过撬具小心插入到胶板之间的缝隙（见图4红色框），从上到下依次轻轻撬开塑料板，直至完全撬开；凝胶可能粘连在胶板的任意一侧，将无凝胶的胶板取下，有凝胶的胶板上有胶一侧浸入水中，胶板倾斜轻轻提起，凝胶掉入水中后，将凝胶从水中取出进行染色或者后续转膜操作。

图4：撬开胶板(撬一侧为例，另一侧重复此步骤)

注意事项

1. SwePAGE预制胶的pH为6.5左右，不含SDS，可用于酸性蛋白的非变性凝胶电泳。