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12% Bis-Tris SwePAGE预制胶(11孔)

¥192
货号:Y2117-10
品牌:YIKE
规格:
  • 10片/盒
数量:

产品信息

产品名称产品编号规格
12% Bis-Tris SwePAGE预制胶(11孔)Y2117-1010片/盒

 

产品简介
 

本产品为聚丙烯酰胺凝胶,单片胶为11孔,单孔最大上样量为80 μL;本预制胶优化于Bis Tris凝胶体系,同等胶浓度条件下拥有更高的分辨率,蛋白条带更加锐利清晰,可配套使用Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer、Tris-MES SDS-PAGE Running Buffer;本产品中搭配Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer(Powder)(Y2062);本产品不含SDS,可用于非变性电泳,依赖于采用合适的电泳缓冲液和相应试剂;与传统实验室自配凝胶相比较,SwePAGE预制胶具有以下优点:

简单易用:即开即用,无需自配,无需接触单体丙烯酰胺等有毒试剂

上样量大:最大上样量可达80 μL

高分辨率:胶配方优化于Bis Tris体系,拥有更高的分辨率,蛋白条带更加锐利

稳定性更优:胶缓冲液pH 6.5,能大大减少丙烯酰胺的降解,提高凝胶稳定性

兼容性更佳:兼容大多数小型蛋白凝胶垂直电泳槽(如servicebio、六一、Bio-Rad、天能等)

 

储存与运输
 

冰袋(wet ice)运输;2-8℃保存,有效期18个月。

 

组成
 

ComponentG2106-10
12% Bis-Tris SwePAGE预制胶(11孔)10片
Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer(Powder)2包
撬具1个
说明书1份

 

SwePAGE预制胶使用步骤
 

1. 将试剂盒中提供的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer(Powder)用纯水溶解并定容至1 L备用;

2. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的预制胶,参照附表一;

3. 将SwePAGE预制胶从包装袋中取出,撕掉胶板底部的胶带,见图1

 

image.png

 图1:撕下胶板底部胶带(红色方框指示处)

4. 将梳子从胶板中慢慢推出,注意两边推力尽量保持一致,见图2

 

image.png

 图2:将梳子从胶板中推出(红色方框指示处)

5. 预制胶电泳前准备工作:以servicebio垂直电泳仪(YVE-2)为例,均带有两款密封硅胶条,凸起款(图3A)和平直款(图3D),原装一般为凸起款,该类密封硅胶条顶部有突起结构,而SwePAGE预制胶其短板是凹形结构且该部位是平直的,因此电泳前需将电泳槽中具有突起结构的密封硅胶条取出反装,平直面朝外或直接换成平直款,防止电泳漏液。具体操作如下:将电泳槽中的U型密封条取出(图3A、B),反装胶条,平直面朝外(图3C)或换成平直款(图3D)重新插回框架内的凹槽,见图3如使用六一品牌电泳槽以上步骤可忽略;完成以上步骤后将预制胶板放入凝胶电泳装置中;

 

image.png

 图3:电泳仪反/换装胶条

注:塑料板装载的时候矮边沿一面朝内,若只进行单块预制胶电泳,另一边请插入挡板,以防电泳液漏液;此处以自研电泳仪凸起款密封胶条为例,如无凸面忽略此步骤。

6. 电泳槽内倒入足够量的Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer,使其覆盖上样孔5-7 mm,在外槽中加入相同的电泳缓冲液以确保适当的冷却。为了获得最好的效果,外槽的缓冲液需要加到比内槽液面稍低的位置,不可漫过胶板;

7. 使用注射器或吸头吸取适量Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer,将上样孔轻轻冲洗干净,去除孔内气泡和残留的凝胶,电泳条件参照附表二;

8. 电泳完成后取出胶板,通过撬具小心插入到胶板之间的缝隙(见图4红色框),从上到下依次轻轻撬开塑料板,直至完全撬开;凝胶可能粘连在胶板的任意一侧,将无凝胶的胶板取下,有凝胶的胶板上有胶一侧浸入水中,胶板倾斜轻轻提起,凝胶掉入水中后,将凝胶从水中取出进行染色或者后续转膜操作。

 

image.png

 图4:撬开胶板(撬一侧为例,另一侧重复此步骤)

 

注意事项
 

1. SwePAGE预制胶的pH为6.5左右,不含SDS,可用于酸性蛋白的非变性凝胶电泳。

2. 点样时吸头尖端垂直插入到上样孔中能够获得最佳上样效果,避免吸头戳破凝胶或使胶板变形导致样品渗漏。

3. 本预制胶可用Y2062或Y2088作为电泳缓冲液,但不能使用Tris-Glycine缓冲液。

4. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。

 

附表一:凝胶选择参照表
 

货号孔数最大上样体积(μL)丙烯酰胺浓度电泳缓冲液转膜缓冲液分离范围
Y211111808%MOPS、MESTris-Bicne、Tris-Glycine20-200 kDa
Y21121360
Y21131640
Y2114118010%MOPS、MESTris-Bicne、Tris-Glycine10-160 kDa
Y21151360
Y21161640
Y2117118012%MOPS、MESTris-Bicne、Tris-Glycine5-120 kDa
Y21181360
Y21191640
Y2120118015%MOPS、MESTris-Bicne、Tris-Glycine3-75 kDa
Y21211360
Y21221640
电泳缓冲液推荐Y2062、Y2088;转膜缓冲液推荐Y2028/Y2039

 

附表二:预制胶电泳参数
 

Running BufferVoltageStarted CurrentFinished CurrentRun Time per Gel
Y2062200 V170-195 mA90-100 mA30-40 min
Y2088200 V180-200 mA140-160 mA20-30 min
注:凝胶的电泳电压请根据实际情况作出相应调整,部分电泳仪底部散热较差,过高的电压导致局部温度过高,影响电泳效果,这时需适当降低电压并冰浴电泳

 

 

附表三:相关产品及订购信息

产品货号
5×蛋白上样缓冲液(还原型)Y2024
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(无气味、还原型)Y2086
Prestained Protein Marker II (10-200 kDa)Y2069
Prestained Protein Marker Ⅵ (55-320 kDa)Y2096
Prestained Protein Marker Ⅶ (8-195 kDa)Y2098
Western Protein Marker I (可显影)Y2097
Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer(Powder)Y2062
Tris-MES SDS-PAGE Running Buffer(Powder)Y2088
转膜缓冲液(干粉)Y2028
免冰浴快速转膜缓冲液(干粉)Y2039
无蛋白快速封闭液Y2063
考马斯亮蓝染液试剂盒Y2023
考马斯亮蓝超快染色液Y2070
蛋白银染试剂盒Y2091
电泳电源(可编程)YPW-6S
垂直电泳仪YVE-2
转印电泳仪YVT-2



 

产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
 

 

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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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