YF012-50T RNASweAMITM 原位杂交DAB检测试剂盒组成及储存条件

a靶标探针货号中#####为每一个探针的唯一数字编码，种属简称：Mm=mouse，Hs=human，Rn=rat，Oc=Rabbit，Bt=Bovine，Dr=zebrafish。

b通透剂有效成分为0.5% Triton X-100，针对不同的细胞可进行调整，如需更低浓度的Triton X-100通透处理细胞，可用无核酸酶的1×PBS对通透剂进行稀释后使用。

c整套试剂可以用于检测50个面积约为20 mm×20 mm的组织点，当用于检测的样本面积较大时，每套试剂能完成的实验次数会相应减少。

d所有试剂在存储条件下有效期12个月，整个试剂盒冰袋低温运输。

RNASweAMI原位杂交简介

原位杂交（In situ hybridization），即YSH技术，基本原理是基于碱基互补配对原则，利用特定标记（如荧光素、地高辛等）的已知序列单链核酸作为探针，与待检测的细胞或组织切片中的靶基因（DNA或RNA）特异性结合，二者经碱基互补配对，形成靶基因与标记探针的杂交体。随后根据探针的标记物，利用不同的显色系统对杂交体进行显色及信号放大，从而对靶基因进行精确定量定位。根据探针的标记物不同，有荧光显色系统、DAB显色系统等。

RNASweAMI YSH原位杂交技术检测流程如图1所示，特异性的寡核苷酸探针通过碱基互补配对原则与组织样本中的靶标RNA杂交，然后通过两个“L”型结构（单链DNA）使得靶标处富集大量的信号探针，实现级联式信号放大，经明场或者荧光成像技术，可观察到靶标RNA处形成的明显点状或团簇状信号。相比于传统的原位杂交直标方法，该方法理论上可以将信号放大400-8000倍，实现单分子RNA的可视化，且具有很高信噪比。

本手册提供使用RNASweAMI原位杂交实验所需的特异性靶标探针（根据用户指定的基因提前设计及合成），地高辛标记的信号探针以及DAB信号检测试剂盒的指南和实验方案。

用户自备材料（见下表1所示）

表 1