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一些溶液和试剂的配制

常用溶液和试剂的配制
1. 30%丙烯酰胺:溶解29克丙烯酰胺和1克甲叉双丙烯酰胺于60毫升去离子水中。加热到37度溶解。加水到100毫升。0.45膜过滤,pH为7.0或更小。贮存在棕色瓶中。注意:pH不能大于7.0,每隔几个月需重新配制。戴手套,勿吸入,勿接触。
2. 10% Ammonium Persulfate (AP)过硫酸氨:应隔周用无离子水新鲜配制。
3. 1M DTT:溶液3.09克DTT于20毫升0.01M乙酸钠中(pH=5.2),过滤除菌,分装,-20度保存(电泳等生化实验用DTT,直接用ddH2O配制后冻存即可)。
4. 0.5 M EDTA (pH=8.0):186.1克EDTA.2Na.2H2O于800毫升水中,剧烈搅拌,用NaOH调pH到8.0(约20克NaOH颗粒加到1000毫升水中),分装,高压灭菌(生化实验用EDTA无需高压灭菌)。
5. 3 M乙酸钠:溶液408.1克乙酸钠.3H2O到800毫升水中。用冰醋酸调
6. pH到5.2或用稀醋酸调pH到7.0。用水调体积到1升。分装,高压灭菌。
7. 10% SDS:溶解100克电泳级SDS于900毫升水中,加热到68度助溶。加几滴浓盐酸调pH到7.2。加水到1000毫升分装。称时戴口罩,不必除菌,室温保存。
8. 1 M Tris:溶解121.1克Tris到800毫升水中,加浓盐酸调pH。PH=7.4, 70 ml; pH=7.6, 60 ml; pH=8.0, 42 ml。冷却到室温再调pH,因为pH随温度变化。最后加水到1升,分装,高压灭菌。如果1 M Tris呈黄色,弃掉。注意:有的电极不能测Tris。
9. 10. PMSF,1000倍贮存液,100 mM于异丙醇,-20度保存。
10. 无DNA酶的RNA酶:将RNA酶A溶于10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 15 mM NaCl中,配成10 mg/ml的浓度,于100 oC加热15分钟,缓慢冷却到室温,分装成小份保存于 minus20冰箱。
11. 消化用EDTA(0.02%):0.02克EDTA溶解于100 毫升PBS中,121度30分钟灭菌,4度保存。
12. PBS (Phosphate Buffered Saline): 1000 ml
NaCl 8 g
KCl 0.2 g
Na2HPO4.12H2O 3.58 g
KH2PO4 0.24 g
ddH2O 800 ml
HCl To adjust pH to 7.4
Bring up final volume to 1 L with ddH2O

 

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