HE染色

苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。
HE染色操作试剂配置
A：0.5~1% 的伊红酒精溶液：
称取伊红Y 0.5~1 g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。
B：苏木素染液配方：(配制3000 ml，可按比列减少)
苏木精 6 g
无水乙醇 100 ml
硫酸铝钾 150 g
蒸馏水 2000 ml
碘酸钠 1.2 g
冰醋酸 120 ml
甘油 900 ml
配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。
C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。
HE染色操作实验流程
1. 石蜡切片：前二甲苯I，5~10 min；
2. 前二甲苯II，5~10 min；
3. 无水乙醇，2 min；
4. 90%酒精，2 min；
5. 80%酒精，2 min；
6. 70%酒精，2 min；
7. 蒸馏水，3~5 min；
8. 苏木素染液，5~7 min，可根据染色结果和要求调整染色时间；
9. 浸水中洗去未多余的染液；
10. 1%盐酸酒精分化3~5 s；
11. 迅速置自来水中，流水蓝化15~40 min；
12. 吸水纸吸去水分；
13. 80%酒精，5 s；
14. 0.5-1%伊红染液，45 s~1 min，可根据染色结果和要求调整染色时间；
15. 95%酒精I，2 s~1 min，根据染色结果和要求调整；
16. 95%酒精I，2 s或迅速；
17. 无水乙醇，1 min；
18. 无水乙醇，1 min；
19. 后二甲苯I，5 min；
20. 后二甲苯II，5 min
21. 中性树胶封片，自然风干或烤干，显微镜观察；
冰冻切片：直接进蒸馏水，以后步骤略同。